En parallèle, le soft offre pour la première fois dans la série un mode multijoueur qui se révèle diablement original. En effet, l'ensemble des modes de jeux offrent des règles uniques et privilégient la discrétion avant de passer à l'action. Les développeurs ont souhaité proposer une ambiance et un gameplay similaires à la campagne solo. Le trailer de lancement fraîchement diffusé par l'éditeur met en évidence les nombreuses techniques d'assassinat possibles, en fonction des armes utilisées et des protagonistes choisis parmi un large choix.
Assassin's Creed Brotherhood sera disponible le 19 novembre 2010 en Europe, sur PS3 et Xbox 360. L'édition PC sera commercialisée début 2011.